Tí, ktorí sa zaujímajú o nové diagnostické metódy, by sa mali naučiť, čo je to metóda PCR. Moderné technické možnosti v oblasti laboratórnych štúdií poskytujú príležitosť na identifikáciu mnohých chorôb v počiatočných štádiách. Polymerázová reťazová reakcia (PCR) je v súčasnosti považovaná za najpresnejšiu a novú metódu.
PCR analýza
PCR analýza - čo to je? Táto metóda využíva princípy molekulárnej biológie. Na štúdium materiálov sa používajú špeciálne enzýmy, ktoré opakovane a rýchlo kopírujú DNA, RNA fragmenty patogénov. Existujú rôzne typy PCR analýzy v závislosti od študovaného materiálu (krv, moč, výkaly atď.). Po spracovaní laboratórny personál porovná s databázou získaný výsledok, identifikuje koncentráciu, typ patogénu.
PCR analýza sa umiestni do špeciálneho zosilňovača (nástroja), ktorý ohrieva a ochladzuje skúmavky s biomateriálom. Na replikáciu fragmentov sú potrebné teplotné zmeny. Presnosť výsledku bude závisieť od presnosti teplotného režimu. Metóda polymerázovej reťazovej reakcie pomáha identifikovať:
- infekčná mononukleóza;
- HIV;
- cytomegalovírusovú infekciu;
- vírusová hepatitída G, C, B, A;
- pohlavne prenosné infekcie / choroby (STI / STD): gardnerelóza, trichomoniáza, ureaplazmóza;
- herpes infekcie;
- onkogénne vírusy;
- listerióza;
- Infekcia Helicobacter pylori;
- kliešťová encefalitída, borelióza;
- tuberkulóza;
- kandidóza.
krvný
V súčasnej dobe, vzhľadom k novosti technológie, krvné testy metódou PCR má stále vysokú cenu. Pre prípravu biomateriálu nie je potrebné spĺňať určité požiadavky. Ani zmeny v zložení spôsobené fyzickou námahou, stresom a zmenou stravy neovplyvňujú výsledok štúdie. PCR krvný test môže pokaziť iba príjem antibakteriálnych látok, preto je potrebné pred prechodom udržiavať pauzu medzi liečbou a testom.
PCR krvné testy sú najbežnejším spôsobom diagnostiky chronických akútnych infekčných patológií pri vírusových alebo atypických prejavoch. Metódy sérologického výskumu majú určité ťažkosti s vedením - stanovenie prítomnosti patogénu sa uskutočňuje prítomnosťou protilátok v ľudskom tele. Výsledok môže byť falošne negatívny, ak stav pacienta nedáva čas na ich produkciu.
škvrna
V oblasti gynekológie sa na vyšetrenie prítomnosti infekčných mikroorganizmov používa PCR. Práca s materiálom sa vykonáva na rovnakom princípe ako s krvou: viacnásobné zvýšenie fragmentov DNA patogénov, aby sa dali ľahko identifikovať. Pomáha tiež odhaliť skryté infekcie u žien. Na analýzu sa môžu použiť rôzne biologické tekutiny: sliny, spúta, moč a krv. V gynekológii sa často používa tampón z vaginálnej sliznice z krčka maternice na určenie presnosti.
Pre PCR existujú určité indikácie. Často je potrebné vykonať identifikáciu typu patogénu odolného voči antibiotikám. U žien sú hlavnými indikáciami pre diagnostiku tejto metódy: \ t
- tehotenstvo, ktoré pokračuje tvrdo;
- akútna fáza VTI;
- ak existuje podozrenie na prechod STI do chronického štádia;
- hľadať príčiny neplodnosti.
kala
Identifikáciu infekcie môže prideliť lekárska analýza výkalov na PCR. Aby ste získali najspoľahlivejšie výsledky po teste, musíte pred zberom biomateriálu dodržiavať nasledujúce pravidlá:
- niekoľko dní prestať užívať preháňadlá lieky: olej, sviečky;
- odstrániť lieky, ktoré dávajú špecifickú farbu výkalov, napríklad s obsahom železa.
Pre plot by mala byť použitá sterilná tyč a nádoba. Niečo navyše ich zotrie, opláchnutie nie je potrebné. Pri zbere materiálu dávajte pozor, aby ste sa nedotýkali vnútorných stien nádoby rukou. Uistite sa, že výkaly neboli nečistoty moču, nemôžete použiť ďalšie pomôcky na výkaly (klystír). Materiál je potrebné zozbierať v deň dodania, stačí 1/3 objemu zásobníka. Táto diagnostická metóda má nasledujúce výhody:
- Analýza môže indikovať DNA parazita, zatiaľ čo iné testy môžu detegovať iba zvyšky ich životnej aktivity.
- Vysoká presnosť, patogén bude nainštalovaný.
- Ultra citlivá analýza, ktorá dokáže detekovať aj jednu bunku vírusu.
- Výsledok testu PCR bude pripravený za 4-5 hodín.
moč
V prípade potreby môže lekár odobrať moč na testovanie. Vysoká presnosť otvára možnosť pracovať s akoukoľvek biologickou tekutinou, z ktorej môže byť vírusová DNA extrahovaná. Ak chcete prejsť analýzou PCR v moči, musíte pred prijatím materiálu dodržiavať tieto obmedzenia:
- najmenej 1 deň pred zákrokom zastaviť pohlavie;
- 3 týždne pred pôrodom musí byť ukončená akákoľvek antibakteriálna liečba, pretože lieky budú rozmazávať obraz;
- je potrebné vykonať analýzu nalačno (tekutina je tiež zakázaná);
- potrebné vziať prvú rannú časť materiálu.
Výsledky testu PCR
Z vyššie uvedeného je jasné, aká PCR analýza je a existujú jasné výhody takejto výskumnej metódy. Ďalším plusom tohto diagnostického postupu je jednoduchosť dekódovania výsledkov. Vzhľadom k tomu, koľko PCR analýzy sa vykonáva (samotný proces trvá asi 5 hodín, ale laboratórium poskytuje údaje za 1-2 dni), táto diagnostická metóda sa stáva najlepšou voľbou pre detekciu množstva infekcií. Podľa výsledkov vám lekár môže povedať, že test:
- Negatívny - v študovanom materiáli nebol požadovaný patogén.
- Zistila sa pozitívna RNA, patogénna DNA.
Niekedy sa vykonáva kvantitatívne stanovenie mikroorganizmov. To je nevyhnutné pre choroby, ktoré spôsobujú oportúnne patogény. Zvláštnosťou týchto vírusov je, že sa objavujú len vtedy, keď sú v prebytku, a je mimoriadne problematické ich nájsť prostredníctvom rutinného výskumu. Tento faktor je dôležitý pre výber terapeutickej taktiky na účinné liečenie vírusových infekcií, napríklad hepatitídy, HIV.
Pre 12 infekcií
Ak chcete úplne pochopiť, čo je PCR diagnostika infekcií a ako je účinná, musíte vedieť, že je schopná izolovať až 12 patogénov. Text sa vykonáva iba v laboratórnych podmienkach. Pre štúdiu sa použili špeciálne enzýmy, ktoré mnohonásobne zvyšujú množstvo RNA, DNA fragmentov vírusu. PCR analýza pre 12 infekcií môže odhaliť:
- Mycobacterium tuberculosis;
- HIV;
- cytomegalovírus;
- hepatitídy C, G, B, A;
- herpes typu 1, 2;
- Vírus Epstein-Barrovej (infekčná mononukleóza);
- infekcie, ktoré sa prenášajú napríklad na chlamýdie;
- listerióza;
- HPV;
- kandidálna infekcia;
- Helicobacter pylori;
- boreliózy, kliešťovej encefalitídy.
Hepatitída C
Táto diagnostická metóda pomáha určiť prítomnosť vírusu v krvi. To dáva lekárom možnosť hovoriť o jeho prítomnosti alebo neprítomnosti. PCR analýza hepatitídy C má dva typy: kvalitatívne a kvantitatívne. Prvá možnosť označuje len jej prítomnosť a môže mať text „zistené“ / „nezistené“. Tento typ testu má citlivú 10-500 IU / ml. To naznačuje, že s nízkym obsahom patogénu v tele bude analýza "nedetekovaná".
Kvantitatívna analýza je presnejšia a ukáže koncentráciu infekcie v krvi. Tento indikátor sa označuje ako "vírusová záťaž", meraná v množstve vírusovej RNA na špecifický objem krvi. Dekódovanie v rôznych laboratóriách sa môže líšiť. Okrem merania sa v jednotkách IU / ml použijú jednotky merania „kópie“. Prepočítať kópie ME môže byť podľa vzorca: 1 IU = 4 kópie. Ak pri dekódovaní hodnoty prítomnosti vírusu presahuje 800 000 IU / ml (alebo 800 * 103), znamená to vysoký obsah patogénu.
Pre tuberkulózu
Test by mal byť v dopoludňajších hodinách. To je dôležité, aby sa zabránilo tomu, že celé spektrum spúta, ktoré sa vytvorilo cez noc, opustí žalúdok. PCR analýza tuberkulózy je rovnako dôležitá ako ELISA, Mantoux, tomograf. Test pomáha identifikovať prítomnosť mykobaktérií, stav moču, celkový imunoglobulín, ESR, aby sa určil stav pľúc v súčasnosti. Pre správnosť získania výsledkov v analýze PCR je potrebné vykonať ju v súlade s nasledujúcimi pravidlami:
- Výsev sa vykonáva 3-krát, ale úplné odsávanie obsahu žalúdka by sa malo vykonávať len v nemocnici.
- Detekuje mykobaktériá naočkovaním prítomnosti masy v žalúdku u menej ako 50% diagnóz. Aj pri optimálnych podmienkach sa odporúča ultrazvuk.
- Aj s negatívnym charakterom výsledku nemožno úplne vylúčiť pravdepodobnosť vzniku tuberkulózy so zmenou ESR, imunoglobulínu alebo iných ukazovateľov.
- Nasadenie materiálov počas PCR je menej náchylné na patologické stavy, ak sa získa ako súčasť bronchoskopického vyšetrenia, ktoré vylučuje podozrenie na TBC u dieťaťa.
Na HIV
Pre mnohých ľudí sa táto diagnóza považuje za trest smrti. Z tohto dôvodu sa človek po častom pohlavnom styku stáva viac pozorným voči signálom, ktoré jeho telo dáva (a niekedy prichádza s nimi). Najspoľahlivejšou možnosťou na získanie potvrdenia alebo odmietnutia tohto ochorenia je test PCR na HIV. Test možno použiť na určenie nasledujúcich možných zdravotných problémov:
- Popieranie / potvrdenie prítomnosti HIV v období seronegatívnej kon.
- Stanovenie genotypu HIV-1, HIV-2.
- Objasnenie opisu patologického procesu s pochybným výsledkom imunoblotu.
- Infekcia po transfúzii krvi.
- Definície HIV statusu u detí, ktoré sa narodili matkám ochorenia.
- Pomáha stanoviť monitorovanie vírusovej záťaže organizmu.
HPV
Papilomavírus môže byť detekovaný v akejkoľvek osobe, po dlhú dobu môže byť v latentnom stave. Vývoj vyvoláva oslabenie imunitného systému, stres alebo emocionálne výrony. PCR analýza HPV pomáha určiť koncentráciu vírusu v krvi. Z tohto dôvodu sa odporúča skôr kvantitatívne stanovenie ako kvalitatívne. Tieto údaje pomôžu predpovedať pravdepodobnosť malígnej povahy infekcie.
Diagnostická technika na prítomnosť HPV je založená na základnej vlastnosti PCR izolovať vírusovú DNA z materiálu. Kvôli vysokej citlivosti testu sa zistí aj malé množstvo baktérií. Kvantitatívny výskum dáva lekárom možnosť stanoviť stupeň nebezpečenstva ochorenia, urobiť prognózu do budúcnosti. Táto diagnóza sa vyžaduje u všetkých mužov a žien, ktorí našli bradavice. Kvantitatívna analýza PCR pomôže určiť, čo spôsobilo rozvoj HPV: dočasné zníženie imunity alebo chronického ochorenia.
Pre herpes
Tento typ diagnózy v mikrobiológii pomáha s vysokou presnosťou vykonať PCR analýzu herpesu. Fragmenty DNA vírusu sa budú kopírovať iba vtedy, ak je v materiáli prítomný požadovaný gén. V tomto prípade môže test výsledkov indikovať prítomnosť alebo neprítomnosť patogénu. Identifikovať to bude možné aj pri nízkych koncentráciách v krvi.
Ďalšou výhodou PCR analýzy je, že môže detegovať herpetickú vírusovú infekciu bezprostredne po infekcii pred nástupom klinických symptómov. Môžete určiť typ herpesu (1 alebo 2), pre analýzu špecifického tréningu sa nevyžaduje, ale lekári odporúčajú pred podaním krvi:
- pražené;
- akútne;
- alkohol;
- tuku.
Počas tehotenstva
Pri prevoze dieťaťa je veľmi dôležité, aby sa tento výskum vykonával s cieľom zaznamenať status ženy. PCR analýza počas tehotenstva je zahrnutá v zozname najúčinnejších metód na stanovenie prítomnosti rôznych ochorení. Je potrebné vykonať test nielen na identifikáciu patológií, ale aj na určenie pravdepodobnosti infikovania dieťaťa v maternici. Len vďaka PCR-diagnostike bolo možné identifikovať stupeň progresie, vývoj rôznych infekcií v maternici matky.
PCR testovanie
Ak sa zaujímate o to, ako sa má vykonať analýza PCR, mali by ste zvážiť každý jednotlivý prípad s prihliadnutím na typ biomateriálu. Škrabanie, rozmazanie alebo odber krvi má svoje vlastné charakteristiky, napríklad:
- plazma sa vzdáva ráno;
- moč sa odoberá len ráno, v laboratóriu v sterilnej nádobe;
- rozmazanie alebo škrabanie bude indikatívne iba po abstinencii od sexuálneho kontaktu najmenej 3 dni;
- Počas menštruácie a 2 dni po nej nemôžete užívať šmuhy.
Kde prejsť testami na PCR
Tento typ výskumu sa týka moderných a high-tech diagnostických metód. Testy by mali byť testované v laboratóriách, ktoré majú všetok potrebný komplex na získanie úplných výsledkov. Rovnako dôležitý je kvalifikovaný a vyškolený personál. Uprednostnite veľké, vážne, dobre známe laboratóriá. To pomôže nielen rýchlo dosiahnuť výsledky, ale aj zaistiť ich spoľahlivosť.
cena
Ďalšia otázka, ktorá často zaujíma pacientov: koľko stojí analýza PCR? Vzhľadom k novosti tejto metódy, potrebe nákupu drahých zariadení, cena testu je relatívne vysoká. Náklady na PCR sú ovplyvnené typom infekcie, ktorá bude testovaná osobou. Orientačná cena a načasovanie testov:
- STI je kontrolovaný v 1 deň, cena je 400-500 rubľov.
- Herpes, HPV, vírus Epstein-Barr, cytomeglovírus zistený za deň, cena - 300-500 str.
- Analýza hepatitídy sa vykonáva za 5 dní, cena za kvalitatívny variant je 500 rubľov, kvantitatívna je 2000 rubľov.
- Helicobacter pylori sa zisťuje za deň, cena je 400 p.
- Antigény, HIV protilátky, cena - od 380 p.
- Kvalitatívna analýza HIV RNA, cena - od 3 500 p.
- Kvantitatívna analýza HIV RNA, cena - od 11 000 r.