Dnes sa stali nevyhnutným činidlom v biologických laboratóriách. Predaj liekov, v ktorých sú monoklonálne protilátky zamerané na liečbu závažných ochorení (psoriáza, rakovina, artritída, skleróza), má obrat mnoho miliárd dolárov. Hoci v roku 1975, keď bol článok publikovaný o spôsobe získania hybridu, len málo verilo v ich praktické použitie.
Čo sú monoklonálne protilátky
Sú produkované imunitnými bunkami pochádzajúcimi z jedného predchodcu patriaceho do rovnakého klonu. Tento jav sa pozoruje, keď sa B bunky pestujú v kultúre. Takéto protilátky môžu byť produkované proti takmer akémukoľvek prirodzenému antigénu (napríklad proti cudzím proteínom a polysacharidom), ktoré sa budú špecificky viazať. Potom sa použijú na detekciu tejto látky alebo na jej čistenie. Monoklony sú široko používané v biochémii, molekulárnej biológii a medicíne. Nie je ľahké produkovať protilátky, ktoré priamo ovplyvňujú ich náklady.
Získanie monoklonálnych protilátok
Tento proces začína imunizáciou zvierat, zvyčajne myší. Za týmto účelom zadajte špecifický antigén, ktorý syntetizuje protilátky proti nemu. Slezina sa potom vyberie z myši a homogenizuje sa, aby sa získala suspenzia buniek. Obsahuje B-bunky produkujúce protilátku. Potom sa zmiešajú s myelómom (myšací plazmocytóm), ktorý má kontinuálnu schopnosť syntetizovať svoj vlastný druh v kultúre (nádorové klony).
Vďaka fúzii sa vytvoria hybridy nádorových a normálnych buniek (hybridómy), ktoré sa kontinuálne pestujú a sú schopné produkovať zmes protilátok danej špecifity. Ďalším krokom po prijatí hybridu je klonovanie a selekcia. Približne 10 fúznych buniek sa umiestni do každej jamky špeciálnej tablety a kultivuje sa na testovanie špecifických imunoglobulínov. Hybridómy z jamiek obsahujúcich požadované identické protilátky (paraproteíny) sa znovu klonujú a kontrolujú. Tak to 1-2 krát.
Výsledkom sú bunky, ktoré sú schopné produkovať vlastné imunoglobulíny len s jednou požadovanou jedinečnou špecifickosťou. Ďalšie klony môžu byť zmrazené a uložené. Alebo kultivovať, hromadiť, vštepiť myši, kde budú tiež rásť. Následne sa imunoglobulínové molekuly získané rôznymi spôsobmi purifikujú z nečistôt a používajú sa na diagnostiku v laboratóriách alebo na terapeutické použitie.
Je dôležité poznamenať, že bunkový klon získaný pomocou hybridómu je myšací imunoglobulín, ktorý po uvoľnení do ľudského tela spôsobí rejekčnú reakciu. Výstup nájdený vďaka rekombinantnej technológii. Odber fragmentu myšacieho monoklonu ho spojil s fragmentom ľudského imunoglobulínu. V dôsledku toho sa získali hybridómy, ktoré sa nazývali chimérické, ktoré boli už bližšie k ľuďom, ale stále vyvolávali imunitné reakcie organizmu, ktoré sa líšili od požadovaných reakcií.
Ďalší krok bol urobený vďaka genetickému inžinierstvu a je spojený s tvorbou takzvaných humanizovaných protilátok, 90% homológnych s ľudským imunoglobulínom. Z počiatočného hybridómového myšieho monoklónu zostáva len malá frakcia bunkovej fúzie, ktorá je zodpovedná za špecifickú väzbu. Používajú sa v klinických štúdiách.
prihláška
Monoklony úspešne vytlačili imunitné séra. Hybridomas vytvoril úžasné príležitosti v analytike: používajú sa ako „mikroskop“ s nezvyčajne vysokým rozlíšením. S ich pomocou je možné detegovať unikátne antigény charakteristické pre rakovinové bunky špecifických tkanív, získať pre ne monoklony určitej špecificity a použiť ich na diagnostiku a typizáciu neoplaziem. Používajú sa pri liečbe psoriázy, sklerózy multiplex, artritídy, Crohnovej choroby, rakoviny prsníka a mnohých ďalších.
Pri psoriáze
Na liečbu závažnej psoriázy sa predpisujú systémové glukokortikosteroidy (steroidné hormóny), ktoré ovplyvňujú ľudské hormóny a potláčajú lokálnu imunitu. Monoklonálne protilátky pri psoriáze pôsobia výlučne na aktívne bunky psoriatického zápalu bez úplného potlačenia imunitného systému. Terapeutickým účinkom je zníženie aktivity zápalu, normalizácia delenia kožných buniek a vymiznutie psoriatických plakov.
Na reumatoidnú artritídu
Monoklonálne protilátky pri reumatoidnej artritíde boli účinné v situáciách, keď iné činidlá nemali terapeutický účinok. V dnešných európskych krajinách sú hlavnými terapeutickými smermi tohto ochorenia také lieky. Terapeutický priebeh je dlhý, pretože lieky pôsobia, hoci účinne, ale pomaly. Kvôli ťažkostiam pri diagnostike artritídy sa má liečba liečiť čo najskôr, s prvými príznakmi a podozreniami.
Na liečbu rakoviny
Pre veľký počet pacientov s onkológiou farmaceutické prípravky obsahujúce monolony obsahovali nádej na zotavenie a návrat do normálneho života. Mnohí ľudia s veľkými malígnymi nádormi v tele, množstvom nádorových buniek a slabo predvídateľnými po priebehu liečby pociťovali zlepšenie svojho stavu. Monoklonálne protilátky na liečbu rakoviny majú zjavné výhody:
- Pripojením k malígnym bunkám ich nielen zviditeľňujú, ale aj oslabujú, porušujú ich štruktúru. Ľudské telo s nimi bojuje oveľa ľahšie.
- Hľadanie ich cieľa prispieva k blokovaniu receptorov rastu nádorov.
- Vývoj protilátok sa uskutočňuje v laboratórnych podmienkach, kde sa zámerne kombinujú s malým množstvom rádioaktívnych častíc. Prenášaním týchto častíc cez telo ich dopravujú priamo do nádoru, kde začínajú pôsobiť.
Princíp ošetrenia
Pôsobenie monoklonov je jednoduché: rozpoznávajú určité antigény a viažu sa na ne. Vzhľadom k tomu, imunitný systém rýchlo upozorní na problém a prichádza s ním. Pomáhajú ľudskému telu vyrovnať sa s antigénmi. Ďalšou veľkou výhodou je, že postihujú len choré bunky bez poškodenia zdravých.
Prípravky s monoklonálnymi protilátkami
Aj keď hybridy normálnych a nádorových buniek tohto typu boli vynájdené prednedávnom, spektrum prípravkov, ktoré ich obsahujú, už vyzerá pôsobivo. Pravidelne sa objavujú nové lieky. Takéto lieky, ako väčšina liekov, majú rôzne vedľajšie účinky. Často, po použití monoklonálnych látok, existujú sťažnosti na prejavy alergických reakcií vo forme svrbenia, vyrážky. Príležitostne je liečba sprevádzaná nevoľnosťou, vracaním alebo črevnou poruchou. Podrobnejšie o účinných prípravkoch.
Stelara
Používa sa na liečbu závažných foriem psoriázy s plakmi. Farmaceutický prípravok sa skladá z ľudských monoclonov, ktoré minimalizujú riziko vedľajších účinkov. Forma uvoľňovania - roztok na podkožné zavedenie do fľaše alebo do injekčnej striekačky. Odporúčaná dávka je 45 mg denne. Druhá injekcia sa podáva 4 týždne po prvej injekcii, potom sa injekcie uskutočňujú 1 krát za 12 týždňov. Terapeutický účinok Stelaru sa prejaví v priebehu 15-20 dní. Udržiavacia liečba zabezpečuje trvanie remisie. Po 2 injekciách sa koža očistí o 75%.
Remicade
Ide o chimérickú protilátku založenú na myšacích a ľudských monoclonoch. Liek znižuje zápal epidermy, reguluje delenie kožných buniek. Form uvoľňujúci - lyofilizovaný prášok na prípravu parenterálneho roztoku alebo v liekovkách s objemom 20 ml. Kompozícia na infúziu sa podáva intravenózne počas 2 hodín rýchlosťou až 2 ml za minútu. Dávkovanie závisí od závažnosti ochorenia. Opakované injekcie sa uskutočňujú 2 a 6 týždňov po prvej injekcii. Na podporu účinku liečby sa opakuje každých 1, 5-2 mesiacov.
Humira
Rekombinantný monoklon s peptidovou sekvenciou identickou s človekom. Liečivo je účinné pri liečbe komplexných foriem psoriázy, ťažkej aktívnej reumatoidnej a psoriatickej artritídy. Používa sa ako subkutánna injekcia do brucha alebo predného femorálneho povrchu. Uvoľňovanie formy - roztok na subkutánnu injekciu. 40 mg injekcie sa podávajú 1 krát za 2 týždne.
Simponi
Zložky farmaceutického produktu sú ľudské monoklony. Používa sa na progresívnu psoriatickú alebo reumatoidnú artritídu, ankylozujúcu spondylitídu. Tento prostriedok pomáha zmierniť príznaky psoriázy nechtov a kože. Uvoľňovanie formy - roztok na subkutánne injekcie (injekčná striekačka alebo autoinjektor). Simponi sa musí podávať subkutánne raz mesačne.
cena
Lieky si môžete kúpiť v Moskve za nasledovné ceny:
|
príprava |
dávkovať |
cena |
|
Stelara |
45 mg (jednorazová dávka) |
158000-224500 r. |
|
Remicade |
100 mg (jednorazová dávka) \ t |
41000-55000 str. |
|
Humira |
40 mg (jednorazová dávka) \ t |
49000-68000 str. |
|
Simponi |
50 mg (jednorazová dávka) |
61000 r. |